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傳代細胞培養/細胞培養

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更新時間: 2017-08-02

傳代細胞培養/細胞培養
傳代細胞的培養使用已成功構建的細胞株,大量培養狀態良好的同種細胞,并維持細胞種的延續。傳代培養是細胞培養常規操作之一,也是所有細胞生物學實驗的基礎。傳代細胞根據細胞的生長習性可分為貼壁細胞和懸浮細胞。

產品介紹:

 

傳代細胞培養

服務原理:
傳代細胞的培養使用已成功構建的細胞株,大量培養狀態良好的同種細胞,并維持細胞種的延續。傳代培養是細胞培養常規操作之一,也是所有細胞生物學實驗的基礎。傳代細胞根據細胞的生長習性可分為貼壁細胞和懸浮細胞。

服務流程:

1.觀察培養基是否正常,細胞狀態如何,細胞密度如何,決定是否傳代。觀察時擰緊蓋子。
2.加熱PBS、versene、培養基,(提前做好) 瓶子不要倒著放,不要讓液體接觸到瓶塞。
3.打開超凈臺(先開風機,后開照明),用75%乙醇清潔臺面,點燃酒精燈。不要把廢液缸拿出去倒,如果廢液太多,可以用其他容器先裝廢液。取小離心管一個,置于架子上。
4.取尖吸管、吸量管各一支,放置在的架上。放置的方式,注意吸管、吸量管前端都不要與架子接觸。
5.取待傳代的細胞。打開versene,用酒精燈外焰燒。燒吸管時距離酒精燈心遠些,不要把渣滓帶進去。把試劑拿入臺子的時候,盡量平穩,不要讓試劑碰到瓶口。
6.用吸量管吸取舊的培養基,置離心管中,吸量管加入versene,然后將versene瓶收起來。(加versene主要是為了將舊培養基洗去)。在離心管中間部分將液體加入。吸液體和加液體時都不要對著細胞。
7.打開胰酶,然后將versene棄掉。換新管,用尖吸管吸取適量胰酶加入。加胰酶后,盡快放平,使細胞消化時間*。
8.將細胞放入37度孵箱。放孵箱2min, 收胰酶,打開PBS. 之后拿出來鏡下隨時觀察。使用二次消化法,去除容器中殘余的細胞。別忘了用舊培養基中和。
9.取細胞,鏡下觀察消化情況。消化程度合適之后(細胞變圓,但不漂起),用尖吸管棄去胰酶,取離心管中的培養基加入細胞,吹打,至所有細胞從培養皿底部脫落下來。用PBS洗細胞,versene對細胞有毒性,且不能被血清中和。然后吸取至離心管中,800 rpm離心5分鐘。
10.吸量管吸取適量培養基加入新的培養皿中。
11.細胞離心畢,用吸新培養基的管棄去上清,先把泡沫吸走。換吸量管吸取培養皿中培養基適量,加入離心管,小體積混勻,將細胞重懸,尖吸管吹勻。
12.擦計數板,用槍吸10ul的液體,計數。不要把槍伸到離心管內。
13.吸量管吸取細胞懸液,加入新的培養皿中。鏡下觀察,搖勻,放入37度孵育。收超凈臺。

科研和臨床應用:
傳代細胞細胞可用于所有細胞實驗,常用于進行細胞增殖、細胞凋亡、細胞侵襲和藥物實驗等多方面的研究。
客戶需提供:
所需培養的細胞或由本公司代購

 

收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

【本公司合作項目】
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傳代細胞培養/細胞培養

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