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細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

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更新時間: 2017-08-02

細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染
細胞轉染的基本原理將外源DNA克隆到載體上后導入細胞,借助宿主細胞表達載體上的目的片段,從而使目的基因在細胞中發揮功能。目前轉染方法有多種,如脂質體轉染法、磷酸鈣-DNA共沉淀法、電穿孔轉染法、腺病毒感染等。

產品介紹:

 

細胞瞬時轉染

服務簡介:

     細胞轉染的基本原理將外源DNA克隆到載體上后導入細胞,借助宿主細胞表達載體上的目的片段,從而使目的基因在細胞中發揮功能。目前轉染方法有多種,如脂質體轉染法、磷酸鈣-DNA共沉淀法、電穿孔轉染法、腺病毒感染等。
      常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,另一類是穩定轉染,前者轉染的外源DNA不整合到宿主染色體中,通常表達只持續幾天,一般在轉染24-72小時后檢測。后者轉染的外源DNA將整合到宿主染色體中,可持續性表達,一般可用于穩定細胞株的構建。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作為轉染試劑,所有實驗步驟及試劑按照廠家建議的用量。實驗中使用轉染試劑在常溫條件下同待轉染質粒/RNA在培養基中組裝成復合體,按照一定的比例將上述裝配產物加入到對數生長期的細胞中。待培養一段時間后,可結合下游實驗檢測項目。

 服務流程:

  1. 質粒:
    a. 進行預實驗,通過轉染含有報告基因的質粒優化轉染條件;
    b. 轉染條件確定后,按照客戶方案進行轉染;
    c. qPCR或Western Blot檢測轉染效率。
    (2)SiRNA:
    a. 根據基因序列,設計并合成siRNA;
    b. 進行預實驗,通過轉染帶有熒光標記的陰性對照siRNA優化轉染條件;
    c. 通過qPCR和Western Blot驗證siRNA的沉默效率,篩選siRNA*使用濃度。

客戶提供:
待轉染細胞株及細胞培養的相關信息,待轉染的質粒信息,目的蛋白一抗;待轉染的SiRNA,預測被調控基因的蛋白的抗體。
交付內容:
瞬時轉染的實驗報告單,含實驗原始實驗圖片、實驗方法、siRNA序列等。

收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務!

詳情請咨詢:

【公司】www.mxbio。。cn
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【公司地址】上海市閔行區滄源路1200號2218室

細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

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